Estudio del papel de miR-148a en la regulación de genes del metabolismo lipídico y la adipogénesis

Abstract

RESUMEN: La presente investigación demuestra la funcionalidad del polimorfismo de nucleótido simple (SNP) rs12720763, situado en la región 3´UTR de APOB, pese a que la predicción bioinformática que preveía la pérdida del sitio de unión de miR-148a-5p, uno de los miRNAs maduros de miR-148a, para uno de los alelos del SNP en esta región 3´UTR no ha podido ser demostrada. Este trabajo muestra que la inhibición tanto de miR-148a-3p como de miR-148a-5p, provoca un aumento en los niveles de APOB en células HepG2 lo que podría suponer un aumento de los niveles de colesterol unido a LDL (cLDL).

Los resultados muestran que la inhibición de miR-148a-3p en células 3T3-L1 provoca la inhibición de la ruta canónica de WNT y un aumento de los niveles de expresión en los marcadores de adipogénesis cuando estas células son diferenciadas a adipocitos. A su vez, el receptor nuclear Nr5a2 regula positivamente los niveles de expresión de miR-148a-3p en preadipocitos 3T3-L1 y tiene un efecto antiadipogénico en estas células. Por último, se demostró que el SNP rs4722551, localizado en la región promotora de miR-148a y asociado con índice de masa corporal (IMC) en una cohorte de Cantabria, es un SNP funcional y se localiza en un sitio de regulación positiva.

ABSTRACT: This research demonstrates the functionality of single nucleotide polymorphism (SNP) rs12720763, located in the APOB 3'UTR region, although the bioinformatic prediction that foresaw the loss of the binding site of miR-148a-5p, one of the mature miRNAs of miR-148a, for one of the alleles of the SNP in the 3'UTR region has not been demonstrated. This work shows that inhibition of both miR-148a-3p and miR-148a-5p, causes an increase in APOB levels in HepG2 cells which could lead to higher levels of LDL cholesterol (cLDL).

The results show that inhibition of miR-148a-3p in 3T3-L1 cells causes inhibition of the canonical WNT pathway and increased expression levels in markers of adipogenesis when these cells are differentiated into adipocytes. In turn, the nuclear receptor NR5A2 upregulates expression levels of miR-148a-3p in 3T3-L1 preadipocytes and has an antiadipogenic effect on these cells. Finally, it was shown that the SNP rs4722551, located in the promoter region of miR-148a and associated with body mass index (BMI) in a cohort of Cantabria, is a functional SNP and is located on an upregulation site.