Análisis del efecto de Inhibidores de JAK sobre el número y función de las células NK en artritis reumatoide

Abstract

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic autoinflammatory disease that primarily affects the joints. The classic treatment of RA consists of the use of conventional disease-modifying antirheumatic drugs (CsDMARDS), mainly methotrexate, leflunomide, hydroxychloroquine and sulfasalazine in combination with their biological analogues (bDMARDS), where TNF-alpha inhibitors are included. Some patients do not improve their disease with this treatment. This is one of the reasons why the new JAK-STAT pathway inhibitor drugs (JAKi) have shown to be a good alternative. However, they appear to reduce the antitumor capacity of NK cells. The main objective of this study is to analyze the effect of these JAKi on the number and functional activity of NK cells and their subpopulations in peripheral blood according to their degranulation measured by the expression of CD107a by flow cytometry. As a secondary objective, the effect of cryopreservation on these cells is compared. Frozen samples from a total of 77 individuals divided into 3 groups were compared: healthy controls (19), RA patients treated with bDMARDS and CsDMARDS (20) and RA patients treated with a JAKi (baricitinib (12), tofacitinib (13), upadacitinib (8) and filgotinib (5)). Also 31 fresh samples from these same patients treated with JAKi were analyzed. No statistically significant differences were found in the number and functional activity of NK cells in patients treated with JAKi compared to the other groups in the frozen samples. However, a reduction in the number of NKt cells in patients treated with JAKi is notable, especially with the drug tofacitinib. The comparison between 11 frozen and fresh samples from the same patients also showed no significant differences in the study parameters, what indicates that cryopreservation could be applied to this kind of experiments.

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinflamatoria crónica que afecta principalmente a las articulaciones. El tratamiento clásico de la AR consiste en el uso de fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad convencionales (CsDMARDS) como metotrexato, leflunomida, hidroxicloroquina y sulfasalazina en combinación con sus análogos biológicos (bDMARDS) entre los que se encuentran los inhibidores de TNF-alfa. Algunos de los pacientes no mejoran su enfermedad con este tratamiento por lo que los nuevos fármacos inhibidores de la vía JAK-STAT (JAKi) han mostrado ser una buena alternativa. Sin embargo, parecen reducir la capacidad antitumoral de las células NK. Este estudio tiene como objetivo principal analizar el efecto de estos JAKi sobre el número y actividad funcional de células NK y sus subpoblaciones en sangre periférica según su desgranulación medida por la expresión de CD107a por citometría de flujo. Como objetivo secundario se compara el efecto de la criopreservación sobre estas células. Se compararon muestras congeladas de un total de 77 individuos divididos en 3 grupos: controles sanos (19), pacientes con AR tratados con bDMARDS y CsDMARDS (20) y pacientes con AR tratados con algún JAKi (baricitinib (12), tofacitinib (13), upadacitinib (8) y filgotinib (5)). Además, se analizaron 31 muestras frescas de estos mismos pacientes tratados con JAKi. No se encontraron diferencias significativas en el número y actividad funcional de las células NK en los pacientes tratados con JAKi frente a los otros grupos en las muestras congeladas. Aunque si es destacable la reducción en el número de células NKt de los pacientes tratados con JAKi, sobre todo con el fármaco tofacitinib. En las muestras frescas no se encontraron diferencias significativas entre fármacos. Finalmente, la comparación entre 11 muestras congeladas y frescas de los mismos pacientes tampoco mostró diferencias significativas en los parámetros de estudio. Lo que indica que la criopreservación es apta para este tipo de pruebas.