La PCR Digital como herramienta para la biopsia líquida y para la monitorización de respuesta en neoplasias hematológicas

Abstract

RESUMEN : La reacción en cadena de la polimerasa digital (dPCR) es una técnica genética que supera a las anteriores en sensibilidad, linealidad, especificidad y reproducibilidad. Esto es gracias a su capacidad de cuantificación en tiempo final sin necesidad de una curva de calibración. Estas características hacen a esta técnica muy prometedora como complemento a otras técnicas en el manejo de pacientes con neoplasias hematológicas, especialmente en la monitorización de ciertas enfermedades caracterizadas por reordenamientos genómicos, así como para la detección de fragmentos de DNA presentes en baja carga difícilmente detectables por las técnicas estándar. En el caso de la Leucemia Mieloide Crónica (LMC), parece incrementar la sensibilidad para buscar pacientes con restos de enfermedad no detectable con la técnica de qRT-PCR convencional, lo que es esencial para la selección correcta de pacientes subsidiarios de discontinuación y. Por otro lado, la dPCR también podría ser un complemento interesante para la detección de fragmentos genéticos presentes en la sangre en pacientes con tumores de presentación sólida. Esto podría complementar el diagnóstico obtenido con técnicas fenotípicas y de imagen, permitiendo conocer variabilidad genómica, así como quizás monitorizar la respuesta frente a determinados tratamientos. En conclusión, la dPCR constituye una herramienta de gran utilidad, en hematología y otros campos, en monitorización de respuesta y potencialmente detección precoz de recaídas. Todo esto de forma poco invasiva al poder detectar fragmentos tumorales en muestras fácilmente accesibles como la sangre periférica.

ABSTRACT : The digital polymerase chain reaction (dPCR) is a genetic technique that exceeds the previous ones in sensitivity, linearity, specificity and reproducibility. This is thanks to its capacity of quantification in final time without the need of a calibration curve. These characteristics make this technique very promising as a complement to other techniques in the management of patients with hematological neoplasms, especially in the monitoring of certain diseases characterized by genomic rearrangements, as well as for the detection of DNA fragments present in low load that are difficult to detect by standard techniques. In the case of Chronic Myeloid Leukemia (CML), it seems to increase the sensitivity to look for patients with traces of disease not detectable with the conventional qRT-PCR technique, which is essential for the correct selection of subsidiary discontinuation and patients. On the other hand, dPCR could also be an interesting complement for the detection of genetic fragments present in the blood in patients with solid presentation tumors. This could complement the diagnosis obtained with phenotypic and imaging techniques, allowing knowledge of genomic variability, as well as perhaps monitoring the response to certain treatments. In conclusion, dPCR is a very useful tool, in hematology and other fields, in response monitoring and potentially early detection of relapses. All this is done in a non-invasive way by being able to detect tumor fragments in easily accessible samples such as peripheral blood.