La interfase molecular entre los sistemas de secreción tipo IV y sus sustratos

Abstract

En los sistemas conjugativos, la proteína acopladora (T4CP) representa la interfase molecular entre el canal formado por el Sistema de Secreción Tipo IV (T4SS) y el sustrato transferido, un complejo nucleoproteico (relaxasa-DNA). En este trabajo hemos estudiado la relación estructural entre la T4CP del plásmido R388 TrwB con los demás componentes del T4SS de R388. También estudiamos los determinantes moleculares implicados en el reconocimiento específico y transferencia del sustrato conjugativo localizados en TrwB y en TrwC (relaxasa). Por otra parte, queríamos conocer hasta dónde podría llegar la versatilidad del T4SS respecto a la célula de destino, usando diferentes receptores de la conjugación como levaduras y mitocondrias. Los resultados de esta tesis indicaron que TrwB es un tercer módulo funcional de la maquinaria conjugativa estructuralmente independiente del complejo multiproteico formado por el T4SS. Del estudio de los determinantes moleculares de reconocimiento específico, encontramos que los residuos cargados positivamente localizados en el canal interno del hexámero de TrwB son importantes para la transferencia del sustrato, y que la señal de translocación de TrwC por el T4SS de R388 se encuentra en el tercio terminal de la proteína. Los datos obtenidos para la transferencia de DNA desde bacterias a levaduras o mitocondrias son prometedores, aunque no concluyentes. Los conocimientos adquiridos en este trabajo aportan aspectos claves de las proteínas acopladoras y su relación con los demás componentes de la maquinaria conjugativa, y sientan las bases para la manipulación de la especificidad de las proteínas acopladoras, así como el intercambio de sustratos por diferentes T4SS.