@misc{10902/36918,
year = {2025},
month = {6},
url = {https://hdl.handle.net/10902/36918},
abstract = {La resistencia bacteriana a los antibióticos es un problema global que continúa
creciendo de forma alarmante. Esta situación, en combinación con la dificultad para
desarrollar y validar nuevos antibióticos, pone de manifiesto la necesidad imperiosa de
buscar nuevas estrategias frente a esta emergencia sanitaria. El mecanismo más
desarrollado y estudiado por el cual las bacterias adquieren la capacidad de transmitir
los genes de resistencia a antibióticos es la transferencia horizontal de genes,
principalmente mediante el proceso de conjugación bacteriana. En bacterias Gramnegativas este proceso es mediado por un Sistema de Secreción Tipo IV, el relaxosoma
y el pilus. Este proyecto se ha centrado en el estudio de parte del complejo del
relaxosoma, usando como modelo el plásmido conjugativo R388. El relaxosoma es
responsable del procesamiento inicial del ADN plasmídico y está compuesto por la
relaxasa TrwC y dos proteínas auxiliares (IHF y TrwA) unidas al origen de transferencia
del plásmido. En este trabajo se ha llevado a cabo la clonación, sobreexpresión y
purificación de la proteína IHF (Factor de Integración del Hospedador) para, en un futuro,
tratar de formar el relaxosoma completo. La formación del complejo IHF-ADN tiene como
objetivo demostrar, en futuros proyectos, que la curvatura inducida en el ADN tras la
unión de IHF favorece el acoplamiento del resto de proteínas.},
abstract = {The emergence and spread of antibiotic-resistant bacteria represent a major and
growing threat to global health. This challenge, combined with the difficulty in developing
new antibiotics, highlights the urgent need to explore alternative strategies to face this
health emergency. The most studied and well-characterized mechanism by which
bacteria acquire and disseminate antibiotic resistance genes is horizontal gene transfer,
primarily mediated through bacterial conjugation. In Gram-negative bacteria this process
involves the Type IV Secretion System, the relaxosome and the pilus. In order to
characterize this system, this project focuses on characterizing components of the
relaxosome complex, using plasmid R388 as a model system. The relaxosome is
responsible for the initial processing of plasmid DNA and it is composed of the TrwC
relaxase and two auxiliary proteins (IHF and TrwA) bound to the origin of transfer of the
plasmid. In this project, the Integration Host Factor (IHF) protein was cloned,
overexpressed and purified. Subsequently, the IHF-DNA complex was assembled. This
study provides the basis for future research, to demonstrate how the DNA U-turn induced
by IHF binding facilitates the recruitment and assembly of other proteins that also
constitute the relaxosome complex.},
title = {Estudio bioquímico y estructural de complejos macromoleculares implicados en la diseminación de genes de resistencia a antibióticos},
author = {Merino Hermoso, Ana},
}